《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中膳食纖維的測(cè)定》膳食纖維測(cè)定儀代替GB/T 5009.88-2008《食品中膳食纖維的測(cè)定》,部分代替GB/T 22222-2008《食品中膳食纖維的測(cè)定酶重量法和酶重量法一液相色譜法》,規(guī)定了食品中膳食纖維的測(cè)定方法(酶重量法),適用于所有植物性食品及其制品中總的、可溶性和不溶性膳食纖維的測(cè)定,但不包括低聚果糖、低聚半乳糖、聚葡萄糖、抗性麥芽糊精、抗性淀粉等膳食纖維組分。
前言編輯本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T 5009.88-2008《食品中膳食纖維的測(cè)定》[1],部分代替GB/T 22222-2008《食品中膳食纖維的測(cè)定酶重量法和酶重量法一液相色譜法》。本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T 5009.88-2008相比,主要變化如下:—標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)修改為“食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中膳食纖維的測(cè)定”;—修改了方法適用范圍;—增加了膳食纖維、總膳食纖維、不溶性膳食纖維、可溶性膳食纖維的定義;—?jiǎng)h除了中性洗滌劑法;—修改了總膳食纖維計(jì)算公式;—添加了當(dāng)食品中含有低分子質(zhì)量可溶性膳食纖維時(shí)總膳食纖維計(jì)算方法的注釋。
本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T 22221-2008相比,主要變化如下:—整合了第一法酶重量法。
范圍編輯
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中膳食纖維的測(cè)定方法(酶重量法)。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于所有植物性食品及其制品中總的、可溶性和不溶性膳食纖維的測(cè)定,但不包括低聚果糖、低聚半乳糖、聚葡萄糖、抗性麥芽糊精、抗性淀粉等膳食纖維組分。術(shù)語(yǔ)和定義編輯膳食纖維(DF)
不能被人體小腸消化吸收膳食纖維測(cè)定儀但具有健康意義的、植物中天然存在或通過(guò)提取/合成的、聚合度DP≥3的碳水化合物聚合物。包括纖維素、半纖維素、果膠及其他單體成分等。可溶性膳食纖維(SDF)
能溶于水的膳食纖維部分,包括低聚糖和部分不能消化的多聚糖等。不溶性膳食纖維(IDF)不能溶于水的膳食纖維部分,包括木質(zhì)素、纖維素、部分半纖維素等?偵攀忱w維(TDF)可溶性膳食纖維與不溶性膳食纖維之和。
原理編輯
干燥試樣經(jīng)熱穩(wěn)定a-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖茸酶酶解消化去除蛋白質(zhì)和淀粉后,經(jīng)乙醇沉淀、抽濾,殘?jiān)靡掖己捅礈,干燥稱(chēng)量,即為總膳食纖維殘?jiān)A砣≡嚇油瑯用附,直接抽濾并用熱水洗滌,殘?jiān)稍锓Q(chēng)量,即得不溶性膳食纖維殘?jiān)?濾液用1倍體積的乙醇沉淀、抽濾、干燥稱(chēng)量,得可溶性膳食纖維殘?jiān)。扣除各?lèi)膳食纖維殘?jiān)邢鄳?yīng)的蛋白質(zhì)、灰分和試劑空白含量,即可計(jì)算出試樣中總的、不溶性和可溶性膳食纖維含量。
本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定的總膳食纖維為不能被a-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖茸酶酶解的碳水化合物聚合物,包括不溶性膳食纖維和能被乙醇沉淀的高分子質(zhì)量可溶性膳食纖維,如纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、果膠、部分回生淀粉,及其他非淀粉多糖和美拉德反應(yīng)產(chǎn)物等;不包括低分子質(zhì)量(聚合度3~12)的可溶性膳食纖維,如低聚果糖、低聚半乳糖、聚葡萄糖、抗性麥芽糊精,以及抗性淀粉等。[2] 試劑和材料編輯注:除非另有說(shuō)明,本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的二級(jí)水。[2] 試劑95%乙醇。丙酮。石油醚:沸程30 ℃~60℃。氫氧化鈉。重鉻酸鉀。三輕甲基氨基甲烷。2-(N-嗎琳代)乙烷磺酸。冰乙酸。鹽酸。硫酸。
熱穩(wěn)定a-淀粉酶液:CAS 9000-85-5 , IUB 3.2.1.1,10 000 U/mL士1 000 U/mL,不得含丙三醇穩(wěn)定劑,于0 ℃~5℃冰箱儲(chǔ)存,酶的活性測(cè)定及判定標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合附錄A的要求。
蛋白酶液:CAS 9014-01-1, IUB 3.2.21.1, 300 U/mL~100 U/mL,不得含丙三醇穩(wěn)定劑,于0 ℃~5℃冰箱儲(chǔ)存,酶的活性測(cè)定及判定標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合附錄A的要求。
淀粉葡萄糖茸酶液:CAS 9032-08-0,IUB 3.2.1.3,2 000 U/mL~3 300 U/mL,于0℃~5℃儲(chǔ)存,酶的活性測(cè)定及判定標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合附錄A的要求。
硅藻土:CAS 688 55-51-9。[2] 試劑配制
乙醇溶液(85%,體積分?jǐn)?shù)):取895 mL 95%乙醇,用水稀釋并定容至1L,混勻。
乙醇溶液(78%,體積分?jǐn)?shù)):取821 mL 95%乙醇,用水稀釋并定容至1L,混勻。
氫氧化鈉溶液(6 mol/L):稱(chēng)取21 g氫氧化鈉,用水溶解至100 mL,混勻。
氫氧化鈉溶液((1 mol/L):稱(chēng)取1 g氫氧化鈉,用水溶解至100 mL,混勻
鹽酸溶液((1mol/L):取8.33 mL鹽酸,用水稀釋至100 mL,混勻。
鹽酸溶液(2 mol/L):取167 mL鹽酸,用水稀釋至1L,混勻。
MES-TRIS緩沖液(0.05 mol/L):稱(chēng)取19.52 g 2-(N-嗎琳代)乙烷磺酸和12.2 g三輕甲基氨基甲烷,用1.7工矛水溶解,根據(jù)室溫用6 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH,20℃時(shí)調(diào)pH為8.3,21℃時(shí)調(diào)pH為8.2,28℃時(shí)調(diào)pH為8.1; 20 ℃~28℃之間其他室溫用插入法校正pH。加水稀釋至2L。
蛋白酶溶液:用0.05 mol/LMES-TRIS緩沖液配成濃度為50 mg/mL的蛋白酶溶液,使用前現(xiàn)配并于0 ℃~5℃暫存。
酸洗硅藻土:取200 g硅藻土于600 mL的2 mol/L鹽酸溶液中,浸泡過(guò)夜,過(guò)濾,用水洗至濾液為中性,置于525℃士5℃馬弗爐中灼燒灰分后備用。
重鉻酸鉀洗液:稱(chēng)取100 g重鉻酸鉀,用200 mL水溶解,加入1 800 mL濃硫酸混合。
乙酸溶液((3 mol/L):取172 mL乙酸,加入700 mL水,混勻后用水定容至1L。[2] 儀器和設(shè)備編輯高型無(wú)導(dǎo)流口燒杯:400 mL或600 mL。
坩堝:具粗面燒結(jié)玻璃板,孔徑;10μm~ 60 μm。清洗后的坩堝在馬弗爐中525℃士5℃灰化6 h,爐溫降至130℃以下取出,于重鉻酸鉀洗液中室溫浸泡2h,用水沖洗干凈,再用15 mL丙酮沖洗后風(fēng)干。用前,加入約1.0 g硅藻土,130℃烘干,取出增禍,在干燥器中冷卻約1h,稱(chēng)量,記錄處理后增禍質(zhì)量(),精確到0.1 mg。
真空抽濾裝置:真空泵或有調(diào)節(jié)裝置的抽吸器。備1L抽濾瓶,側(cè)壁有抽濾口,帶與抽濾瓶配套的橡膠塞,用于酶解液抽濾。
恒溫振蕩水浴箱:帶自動(dòng)計(jì)時(shí)器,控溫范圍室溫5℃ ~100℃,溫度波動(dòng)士1 ℃ 。
分析天平:感量0.1 m g和1 mg。
馬弗爐:525℃士5℃。
烘箱:130℃士3℃。
干燥器:二氧化硅或同等的干燥劑。干燥劑每?jī)芍?30℃士3℃烘干過(guò)夜一次。
p H計(jì):具有溫度補(bǔ)償功能,精度士0.1。用前用pH 1.0、7.0和10.0標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校正。
真空干燥箱:70℃士1℃。
篩:篩板孔徑0.3 mm~0.5 mm 。[2]